miRNA 靶基因预测与验证
1) 客户提供:
a. 基因名;
b. Gene ID;
c. 基因3’UTR序列;
d. miRNA名称及Accession ID;
e. miRNA的预测靶点及突变序列;
f. 待实验细胞系及转染效率;
g. 该细胞的miRNA表达丰度。

2) 服务流程:
a. 请将客户需提供信息发送至销售经理;
b. 签订《miRNA 靶基因验证服务合同》,并签字(或盖章),传真回公司服务部;
c. 支付预付款,并传真汇款凭证回公司服务部;
d. 服务正式启动。
 

3) 服务价格


服务名称

价格(人民币)

报价

miRNA 靶基因预测与验证服务

¥10000


4) 服务周期

预计35个工作日,依具体实验而定。


5) 提供结果

实验报告书。


利用miRNA产品及报告基因质粒载体体外验证miRNA潜在靶基因。
       将miRNA mimic与pmiR-RB-Report™报告基因质粒载体共转目的细胞系,通过萤火虫萤光素酶的活性分析,即可获得miRNA对潜在靶基因的调控作用的验证数据。

        pmiR-RB-Report™报告基因质粒载体转录后可形成海肾荧光素酶与靶基因3’UTR区域组合而成的特殊mRNA,如果miRNA mimic能够与包含靶基因3’UTR的mRNA互补结合,则荧光素酶的表达活性也受到显著调控,故通过检测荧光素酶的荧光强度即可定量分析miRNA对靶基因的mRNA调控效果。


  

       由于pmiR-RB-Report™报告基因的3’UTR长度不一,大多数长度为1~2.5kb之间。一般建议构建长度不超过2.5kb,同时建议构建单位点突变载体。








       将pmiR-RB-Report™ h-AKT1报告基因质粒载体(1ug)及hsa-miR-146a mimic (50nM)共转A549细胞系,采用双荧光素酶检测试剂盒检测结果表明hsa-miR-146a对AKT1 3’UTR有显著调控作用。



 将pmiR-RB-Report™ h-BCL2报告基因质粒载体(1ug)及hsa-miR-9 mimic (50nM)共转A549细胞系,采用双荧光素酶检测试剂盒检测结果表明hsa-miR-9对BCL2 3’UTR有较明显调控作用。

粤公网安备 44011202000534号