靶基因3’UTR载体构建

1) 客户提供:
a. 基因名
b. Gene ID
c. 基因3’UTR序列信息

2) 服务流程:
a. 请提供您所需要构建的基因名,GeneBank登录号或者基因3’UTR序列信息发送至销售经理;
b. 签订《3’UTR质粒载体构建合同》,并签字(或盖章),传真回公司服务部;
c. 支付预付款,并传真汇款凭证回公司服务部;
d. 服务正式启动。


3) 服务价格

服务名称

价格(人民币)

报价

3’UTR报告基因载体构建服务

¥3500

注:
a. 靶基因3"UTR长度须小于2.5kb,否则价格及合成周期另计;
b. 单位点突变价格同上,多位点突变价格及合成周期另计。


4) 服务周期

22个工作日


5) 提供结果

a. 靶基因3’UTR载体质粒2ug;
b. 包含测序图谱的载体构建报告书。


6) 备注

客户需准备荧光照度计及双荧光素酶检测试剂盒。


 我们可提供基于人、小鼠、大鼠基因组的pmiR-RB-Report™靶基因3’UTR质粒载体构建服务,其中人源数百个基因已经构建完成,请点击pmiR-RB-Report™靶基因3’UTR质粒载体产品页面查询,其他基因需定制。

        pmiR-RB-Report™报告基因检测系统专门用来检测miRNA与靶基因是否可能存在调控作用,该报告系统报告荧光(hRluc),其下游构建了靶基因3’UTR区域,通过对该荧光的监测,即可验证miRNA对该靶标是否有调控作用;另有一校正荧光(hluc) 作为稳定内参,用于监测质粒表达效率。

图1 pmiR-RB-Report™质粒图谱简图


1) 由于基因的3’UTR长度不一,一般建议构建长度不超过2.5kb。超过2.5kb长度的载体构建难度较大,价格及构建时间需咨询。

2) 建议构建单位点突变载体以验证靶点作用有效性。突变载体构建主要依据预测的miRNA与靶基因3’UTR的稳定结合区域(即种子区)。通过多个碱基突变导致miRNA与靶基因3’UTR区域的结合能力大大降低,从而判断是否存在miRNA的调控作用。

图2 hsa-miR-520a-3p与h-AKT1 3’UTR区域的结合位点

图3 突变位点通常采用种子区突变方式



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