灵敏:对凋亡细胞的标记(细胞染色)的*大强度高于切口平移法。 快速:使用荧光素dUTP,可以在TUNEL反应后直接分析样品,但必须在加入次级检测系统之前。 方便:使用荧光素dUTP直接标记,可以在检测过程中验证TUNEL反应的效率。 **:在分子水平(DNA链断裂)检测细胞凋亡,检测处于凋亡早期的细胞。 灵活:无需底物;可以选择多种染色方法。
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
1个试剂盒包含3种组分。
In Situ Cell Death Detection Kit, POD是基于对细胞凋亡早期阶段的DNA单链和双链断裂进行检测。 对凋亡细胞进行固定和通透性处理。然后,将细胞置于包含有TdT和荧光素dUTP的TUNEL反应混合液中进行孵育。在此孵育过程中,TdT催化将荧光素dUTP连接到单链或双链DNA的游离3′-OH基团上。进行洗脱步骤之后,用带有过氧化物酶标记的抗荧光素抗体对DNA损伤位点结合的dUTP进行标记。洗脱去除未结合的酶偶联体之后,对**复合物留存的POD进行底物显色。
储存条件(工作液):TUNEL反应混合液 TUNEL反应混合液应当在使用前制备,不宜保存。在使用之前应一直置于冰上。 Converter-peroxidase Converter-peroxidase融化后应保存于2~8 °C 下(*长保存6个月)。 备注: 注意:不要冻存。 样本材料:Cytospin和细胞涂片的准备,玻片上生长的贴壁细胞,以及冰冻和石蜡包埋的组织切片。
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